人生就是博-尊龙凯时旗下的RAW2647细胞系是一种经典的小鼠巨噬细胞系，因其易于培养和操作而广受科研工作者欢迎。然而，这些细胞在培养过程中容易出现分化现象，导致细胞形态和功能发生改变，从而影响实验结果的可靠性。那么，如何保持RAW2647细胞的原始形态和功能呢？本文将揭秘RAW2647细胞培养的黄金法则，帮助您轻松掌握这一细胞系的培养技术！

细胞信息

• 倍增时间：11-30小时（细胞生长快速，营养消耗也快，因此建议在T25培养瓶中添加7ml完全培养基，并于次日观察生长速度）
• 传代比例：1:4-6
• 培养体系：DMEM高糖（品牌：中乔新舟货号：ZQ-100）+10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）
• 细胞形态：该细胞株的形态包括松散贴壁的纺锤形细胞和圆形或立方形细胞。当细胞密度较大时，细胞可能轻微脱落并变圆，部分细胞则可能相互堆积，一些细胞会漂浮。漂浮的细胞是活的，需在传代时收集并离心，细胞沉淀可继续培养。
• 换液频率：2~3次/周

正确的传代方法

掌握正确的传代方法是RAW2647细胞培养的关键。每个操作细节都需格外注意，一不小心就会导致细胞分化。请注意，RAW2647细胞不能采用胰酶消化，因为胰酶会增加细胞分化的风险。我们在培养RAW2647细胞方面积累了十余年的经验，开发了刮刀传代的方法。此方法操作简单，可以有效控制细胞的分化。

替代传代方法

如果您未备有刮刀，可以按照以下步骤进行传代，以减少细胞分化：

• 待细胞密度达到80%时，轻轻拍打培养瓶尾部，观察细胞脱落情况。
• 在拍打过程中，50-80%的细胞会脱落，此时即可收集脱落的细胞。
• 根据1:4-6的比例进行传代，并补充新鲜的完全培养基（如T25瓶中添加7ml培养基）。
• 切记避免使用枪头或巴氏吸管吹打，以免吹打力度不一造成细胞分化。

培养须知

• 在放入培养箱后静置2-4小时，观察细胞贴壁情况并拍照记录。
• 如有少量漂浮细胞，需离心1200转5分钟以收集细胞，贴壁细胞可按视频步骤处理，如无刮刀则可参照上述替代方法。
• 若在操作密度把控及步骤上有疑问，建议及时联系人生就是博-尊龙凯时的销售或技术人员。

培养注意事项

• 传代不需要使用胰酶消化。可使用无菌细胞刮拭培养表面，以刮落细胞后收集离心，重悬接种到新培养瓶中。
• 细胞形态包括松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形细胞，密度增加时，漂浮细胞的数量也会增加。漂浮细胞是存活的，应收集并离心，继续培养。
• 注意选择高质量的胎牛血清，以免影响细胞的贴壁能力与分化。
• 培养条件、运输和环境变化等因素可能会影响细胞状态，因此收到细胞后需调整期间，请耐心细致地培养。
• 强烈推荐使用人生就是博-尊龙凯时提供的培养基，以减少细胞培养过程中的变量。

RAW2647冻存管复苏步骤

• 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37℃水浴中解冻（或通过干冰盒转移到实验室）。
• 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀（15ML离心管中添加3ml）。
• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清，使用新鲜培养基重悬细胞（T25中添加7ml）。
• 将细胞接种于培养皿中，放置在37℃、5%CO₂的培养箱中培养。

以上步骤有助于确保您在使用RAW2647细胞时获得最佳的实验效果，欢迎联系人生就是博-尊龙凯时获取更多支持与指导！