新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是早产儿中一种常见且致命的肠道疾病，尽管其发病机制尚未明晰。近期，在《Immunity》期刊上发布的一项研究揭示了胆汁酸受体FXR如何通过调控肠道上皮细胞的铁死亡和ILC3功能失调，加剧NEC的发展，并提出了潜在的治疗靶点。本文将深入解析这项研究的重要技术、实验设计及核心结论。

核心实验技术概述

本研究采用多组学技术和先进的分子生物学方法，逐层验证科学假说：

• 单细胞RNA测序(scRNA-seq)被用于分析NEC小鼠肠道上皮细胞(IECs)的转录组异质性，从而确认FXR在肠细胞中的特异性高表达。
• 通过流式细胞术检测IECs中的FXR蛋白表达，并对ILC3(CD45⁺Lin⁻CD902⁺CD127⁺KLRG1⁻)进行功能分析。
• 实施多重荧光免疫组化(mIHC)实验，通过设计不同的标记组合，揭示FXR与肠道氧化损伤的时空关系。
• 应用脂质组学(LC-MS/MS)定量分析磷脂过氧化物，确认FXR通过上调ACSL4促进铁死亡。
• 构建肠道特异性FXR敲除小鼠(Fxr^AlEC)，结合NEC诱导模型进行实验。
• 染色质免疫沉淀(ChIP)及荧光素酶报道验证FXR与ACSL4启动子的结合，调控其转录活性。

样本分组逻辑

该研究通过临床样本和动物模型进行了双向验证：

• 临床样本方面，NEC组包括6例手术确诊的NEC患儿（采集血浆和肠道组织），对照组则由6例年龄匹配的非NEC患儿（在手术中取正常肠段）组成。
• 在小鼠实验中，依据基因型分为Fxr^AlEC（肠道FXR敲除组）与Fxr^fl/fl（野生型对照），并设置不同的干预分组。

颠覆性结论

• FXR是NEC的关键驱动因子：研究发现NEC患儿肠道中FXR表达显著升高，与血浆FGF19（FXR下游靶标）正相关，表明FXR的激活与疾病加重有关。
• 微生物-上皮细胞互作失衡：NEC相关菌群紊乱导致短链脂肪酸（SCFAs，如丁酸）的减少，解除对FXR的抑制，从而引发肠上皮的铁死亡。
• 铁死亡-ILC3轴加重炎症：FXR通过转录激活ACSL4促进脂质过氧化和铁死亡，死亡的上皮细胞释放氧化磷脂(PEox)抑制ILC3分泌IL-22，削弱肠道屏障的修复能力。
• 新治疗策略：靶向抑制肠道FXR、ACSL4或铁死亡的干预措施能显著缓解小鼠NEC症状，提升生存率超过50%。

临床转化启示

• 诊断标志物：血浆FGF19及脂质过氧化物(LPO)可能成为NEC的早期预警指标。
• 治疗方向：开发针对肠道特异性FXR拮抗剂（如Gly-β-MCA）或铁死亡抑制剂，通过益生菌或丁酸调控肠道菌群。

人生就是博-尊龙凯时，这项研究首次揭示了FXR-铁死亡-ILC3轴在NEC中的核心作用，为我们理解肠道炎症的分子机制提供了新的视角，同时为临床干预指明了精准的靶点。多组学技术与多物种模型的结合，彰显了转化医学研究的强大力量。