在生物医学研究中,电泳缓冲液的配制是重要的实验步骤之一。以下是50×Tris-乙酸(TAE)和5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液的配方及制备方法,帮助科研人员在实验中取得更佳效果。
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
为配制1L的50×Tris-乙酸缓冲液,各成分用量如下:
- 2mol/L Tris碱:242g
- 1mol/L 乙酸:571ml的冰乙酸(174mol/L)
- 100mmol/L EDTA:200ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 水:补足至1L
5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
为配制1L的5×Tris-硼/酸缓冲液,各成分用量如下:
- 445mmol/L Tris碱:54g
- 445mmol/L 硼酸盐:275g
- 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 水:补足至1L
染料制备
常用的染料包括1%的溴酚蓝和1%的二甲/苯青FF,具体配制方法如下:
- 1%溴酚蓝:将1g水溶性钠型溴酚蓝溶于100ml水中,搅拌至完全溶解。
- 1%二甲/苯青FF:将1g二甲/苯青FF溶解于适量水,并定容至100ml。
- 10mg/ml溴化乙锭:小心称取1g溴化乙锭,加入100ml水中,在磁力搅拌下搅拌直至完全溶解,最终用铝箔包裹,储存于4℃。
上样液制备
各种凝胶上样液的配制方法如下:
- 6×碱性凝胶上样液(室温保存):
- 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):补足至10ml
- 6×聚蔗糖凝胶上样液(室温保存):
- 0.15%溴酚蓝
- 15%聚蔗糖(400型):补足至10ml
- 6×甘油凝胶上样液(4℃保存):
- 50%甘油和0.15%溴酚蓝:补足至10ml
- 10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温保存):
- 0.2%溴酚蓝,0.1% SDS:补足至10ml
在进行生物医学实验时,正确配置缓冲液是确保实验成功的关键。通过精确的配方,不仅能优化实验结果,还能提高数据的可靠性。选择人生就是博-尊龙凯时的产品,可以为您的科研项目提供有力支持,帮助您在生物医学领域取得突破性进展。