人生就是博-尊龙凯时提供了有关血清保存与处理的详细指南,确保您的实验质量得到保障。以下是保存和使用血清的最佳实践。
1. 血清的保存与冷冻方法
在储存和冷冻血清时,务必遵循以下步骤以保持产品质量。首先,将血清从冷冻箱取出后,置于2~8℃的冰箱中慢慢解冻,并在室温下确保其完全融化。在解冻过程中,定期轻轻摇晃以确保均匀分布。需注意的是,长时间在2-8℃贮存可能导致血清中的某些蛋白与脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)聚集形成沉淀或混浊。为避免此情况,建议将血清存储在-20℃以下,并避免频繁冻融。如果一次无法使用完一瓶血清,建议将其无菌分装至适当的容器,再放回冷冻保存。
2. 血清中的沉淀物及处理方法
血清中出现的絮状沉淀物主要由纤维蛋白和脂蛋白组成,这种现象是正常的,不会影响血清的特性。要去除沉淀物,可以通过离心(400g,1-2分钟)或静置使其沉降在瓶底,然后小心将血清转移到无菌瓶中。建议避免使用过滤的方法,因为沉淀可能堵塞滤膜。通常情况下,轻轻摇晃并加热至37℃后,这些沉淀物会重新溶解。因此,在使用血清前,轻轻摇晃并加热至37℃即可。
3. 选择适合的血清
在选择血清时,国内普遍认为HYCLONE的血清质量较好,而根据我在北美的观察,国外用户通常认为GIBCO的血清表现更佳。这表明,价格并非决定血清质量的唯一因素。总的来说,这两种血清的价格相对较高,但对于不太娇气的细胞,国产血清也足够使用。此外,HYCLONE和GIBCO在国内并未设有生产线,我们通常只能通过代理商购买,因此存在买到假货的风险。我通常选择直接从厂家或知名的生物公司如Wisent直接采购,尽管它们在国内的知名度不高,但实际上在国际市场上表现优秀,且其血清质量与HYCLONE相当,价格更为优惠。
4. 防止血清沉淀的方法
为了避免血清中出现沉淀,可以遵循以下操作建议:
- 在冻结血清时,时常轻轻摇匀,以保持温度和成分一致,减少沉淀的形成。
- 在分装血清前,务必摇匀,但要小心避免气泡产生。
- 避免将血清直接从-20℃迅速加热至37℃,因温差过大会导致蛋白质凝聚,从而产生沉淀。
- 减少在37℃下放置的时间,避免使血清变得混浊并导致不稳定成分的破坏,从而影响整体质量。
- 热灭活可能会增加沉淀物,如果不是特别需要,建议不进行此步骤。
- 如确需热灭活,请遵循56℃,持续30分钟的原则,且保持摇匀。过高温度、过长时间或摇匀不均都会导致沉淀的增加。
5. 小牛血清与胎牛血清的区别
小牛血清(Calf Serum,CS)和胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)来源不同。胎牛血清是通过心脏穿刺从怀孕母牛处采集的,而小牛血清则来源于出生10至14天的小牛。二者所含的促细胞生长因子、激素及其他活性物质的成分和比例各有不同,因此其用途也有所不同。一些细胞仅能在胎牛血清中生长,而另一些则可以在小牛血清中生长。使用浓度方面,常用浓度为5%-10%,若有特殊要求,可能需要达到20%。
在保存与使用血清时,务必遵循-5℃至-20℃的贮存条件,且若在4℃存放,不应超过一个月。冷冻血清时,须先在2-8℃冰箱内进行均匀解冻,切勿直接放入37℃的温箱,这样会导致色彩加深及粘稠度增加。确保经过冷冻后按需分装并存于-20℃,以避免反复冻融。如需进一步指导,请随时联系人生就是博-尊龙凯时!