树突状细胞的发现与发展历程

1973年，加拿大科学家Ralph M. Steinman在美国洛克菲勒大学的研究中首次鉴定出树突状细胞（Dendritic Cells, DC）这一重要免疫细胞。这一发现为后来的免疫学研究奠定了基础，Steinman也因此获得了2011年诺贝尔生理学或医学奖。

1992年，日本京都大学的Inaba在添加粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的条件下，成功从小鼠的血液和骨髓细胞中体外诱导出大量的树突状细胞。这一创新方法使Inaba成为小鼠DC体外培养的开创者，Inaba法也因此被广泛认可为小鼠BMDC培养的经典方法。相关的实验步骤确保了细胞培养的有效性和稳定性，包括去除淋巴细胞的抗体+补体法与定期换液的策略。

1994年，奥地利因斯布鲁克大学的Romani等发现，结合使用GM-CSF和白细胞介素4（IL-4）能够从人类的外周血单个核细胞（PBMC）中大量制备树突状细胞，而单独使用GM-CSF的效果则相对较差。这一发现后也被应用于小鼠BMDC细胞的培养中，进一步推动了树突状细胞研究的发展。

1999年，德国明斯特大学的Labeur研究表明，单独使用GM-CSF诱导的BMDC为未成熟树突状细胞，结合使用GM-CSF与IL-4则可培养出中等成熟度的细胞。同时，通过添加CD40L或脂多糖（LPS），可以进一步促进这些DC的成熟，形成完全成熟的树突状细胞。

同年，来自德国埃尔朗根大学的Lutz开发出一种新方法，极大地提高了BMDC的产量，每只小鼠可获得的DC数量是Inaba经典方法的50倍，达到1-3x10⁸个DC。这种方法得到DC研究者的广泛采用，并为进一步的研究提供了充足的细胞资源。

2002年，美国匹兹堡癌症研究院大学的Son也推出了另一种高效的BMDC培养方法，称为bulk-culture method。通过该方法，每只小鼠可获得的BMDC数量是Inaba经典方法的7-10倍，约为3-4x10⁷个BMDC，并且培养时间仅需7天，具有较高的实用性。

总的来说，树突状细胞的研究历程显示了生物医学领域的不断发展和创新，相关的培养方法为进一步的疾病治疗和免疫研究提供了重要的基础。更多的相关技术和培养操作手册，请联系人生就是博-尊龙凯时，以获取最新信息和支持。